羊水細胞培養染色體檢查

羊水細胞培養染色體檢查概述

由于有害化學物質、X線照射、環境因素影響，高齡妊娠，近親配婚等，導致妊娠時染色體的數目、形態、結構及結合上發生變異所引起的疾病。羊水細胞的染色體檢查，對染色體疾病的產前診斷具有很大的特異性意義。

• 檢查部位 腹部
• 科室 婦產科
• 相關疾病 小兒腦性癱瘓 遺傳病 Ehler-Danlos綜合征 早產 過期妊娠 破水 難產 母兒血型不合溶血病 流產 小兒腦癱 小兒先天性睪丸發育不全 小兒先天性卵巢發育不全 小兒貓叫綜合征 小兒帕套綜合征 小兒唐氏綜合征 自然流產 迪格奧爾格綜合征
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• 相關癥狀 陰囊腫大 男子性功能障礙 陰道出血 頜小 水平掌褶紋(通貫手) 耳朵位置低 流產 染色體畸形 產后出血 絕經 月經量多
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羊水細胞培養染色體檢查正常值

• 染色體總數46條。
  常染色體22對(序號為1~22)。
  性染色體男性為XY，女性為XX。
  男性核型46，XY。
  女性核型46，XX。

羊水細胞培養染色體檢查臨床意義

• 染色體數量異常如唐氏綜合征(21三體綜合征)、18三體綜合征、13三體綜合征、8三體綜合征、22三體綜合征、先天性睪丸發育不全綜合征、XXY綜合征、特納綜合征、X三體綜合征和多X體綜合征等。
  染色體結構異常如4p部分單體綜合征、5p部分單體綜合征、9p部分三體綜合征、9q部分單體綜合征、21q部分單體綜合征、22q部分單體綜合征、22q部分三體綜合征等。

羊水細胞培養染色體檢查檢查方法

• (1)取孕期16～20周羊水15～30ml，1000r/ml離心10min。
  (2)棄去多余上清液，留1ml羊水和沉淀細胞，輕輕打散成細胞懸液。
  (3)移入25ml方形培養瓶中，加pH6.5～6.8(含青霉素100U/ml，鏈霉素100μg/ml)的培養基3ml及小牛血清1ml，置37℃溫箱中培養。
  (4)培養7～10天后可見大量成纖維樣或上皮樣細胞集落。此時可調換新鮮培養液。
  (5)待細胞集落擴大成片，并有許多透亮的圓形分裂細胞時，即可加入秋水仙素，使最終濃度為0.1～0.3μg/ml，置37℃溫箱中再培養5～6h(上述過程均在無菌條件下進行)。收獲標準：①以成纖維細胞為主要類型，成片細胞生長；②以10倍目鏡和20倍物鏡觀察，生長的細胞克隆覆蓋1個或1個以上完整視野；③見到10個以上透亮的圓形細胞和10個以上雙圓形光亮的分裂細胞。
  (6)如果細胞生長不旺盛，生長周期不齊或細胞老化，未達收獲標準，可在原瓶繼續傳代培養。方法：在無菌條件下先倒去培養液，加入2.5g/L無菌胰蛋白酶液數滴，搖動后倒去。再加入胰蛋白酶5～10滴，在37℃下輕輕搖動約5min，使貼壁細胞脫落。加入含小牛血清的新鮮培養基4ml，在37℃靜置培養4～5h。再小心更換培養液，繼續培養，一般傳代后3～5天即可收獲。
  (7)將培養液移至刻度離心管中，加ED-TA-胰蛋白酶液1ml于培養瓶內，置37℃溫箱中5min，然后用彎頭吸管沖洗貼壁細胞(也可用2.5g/L胰蛋白酶溶液消化)。將脫離瓶壁的細胞倒入離心管中，與原培養液相混合，并用少量溫熱生理鹽水沖洗培養瓶，洗下的細胞也一并倒入該離心管，以1000r/min離心10min。
  (8)吸棄上清液，加入預溫37℃的0.075mol/L KCl低滲液3～5ml，置37℃10～15min。
  (9)預固定、固定及制片均與外周血細胞染色體標本的制備法相同。 

羊水細胞培養染色體檢查注意事項

• 1、染色體檢查須于妊娠16~20周時取羊水標本。
  2、這些先天性遺傳病的染色體有增多、缺乏、易位、倒置等數量和結構的異常，常表現為一種綜合征。如多發性畸形、生長遲緩和智力缺陷等，多數導致胎兒流產、早產或死產。