間接免疫熒光試驗概述
用對應某一種抗原的抗體(這里被稱為一抗)與細胞孵育結合,在采用對應一抗(也就是抗一抗)的抗體(這里被稱為二抗,二抗上偶聯有熒光素分子)與細胞孵育結合后在熒光顯微鏡下觀察。
間接免疫熒光試驗正常值
<1:64
間接免疫熒光試驗臨床意義
單份血清效價≥1:64或雙份血清效價呈4倍增長或有IgM抗體出現即可診斷為立克次體感染。本法不能區分患者感染的立克次體的類型。特異性抗立克次體的IgM抗體的出現提示新近感染。
間接免疫熒光試驗檢查方法
(1) 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度?!?br /> (2) 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其完全覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內,保溫一定時間(參考:30min)?!?br /> (3) 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩?!?br /> (4)取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋?!?br /> (5)立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+”表示: (-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++”以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
間接免疫熒光試驗注意事項
檢查前:抽血前一天不吃過于油膩、高蛋白食 物,避免大量飲酒。血液中的酒精成分會直接影響檢驗結果。體檢前一天 的晚八時以后,應禁食,以免影響第二天空腹血糖等指標的檢測?!z查時:應放松心情,避免因恐懼造成血管的收縮、增加采血的困難
不適宜人群:沒有。